细胞简介

该细胞系源自一位1岁男孩的外周血，该男孩被诊断为急性单核细胞性白血病。此细胞能够有效吞噬乳胶颗粒和激活的红细胞，且细胞膜和胞浆内未发现免疫球蛋白，显示出C3R和FcR的表达。细胞可被佛波酯TPA诱导向单核系方向分化，并可用作转染宿主。

细胞信息

细胞名称：Thp-1人单核细胞白血病

生长特性：悬浮生长且低密度易聚团，高密度时细胞分散。

倍增时间：60-70小时（PubMed=6970727）；26小时（PubMed=25984343）；~35-50小时（DSMZ=ACC-16）。

换液频次：每周2~3次。

传代比例：1:2-1:4（具体比例视实际细胞数量而定）。细胞密度应在8X10^6/ml进行传代，不可超过1X10^6/ml。

培养基推荐配方：

RPMI-1640（中乔新舟货号：ZQ-200） + 10%胎牛血清（中乔新舟货号：ZQ0500） + 1%双抗（中乔新舟货号：CSP006） + β-Mer终浓度：0.05mM（中乔新舟货号：CSP005，例：在500ml中添加500μl）。

β-巯基乙醇是一种常用的培养补充剂，具有抗氧化特性，有助于降低氧化应激对THP-1细胞的影响。当细胞密度过高需要维持时，可以适量增加巯基乙醇的比例（最高不超过标准量的15倍）。

THP-1细胞复苏

THP-1细胞复苏后通常需要3-5天才能恢复状态，细胞的增殖对密度有依赖性。如果复苏时去除了冻存液，建议在48小时内不要对细胞进行操作。细胞密度较低时，细胞会以聚团形式生长，属于快速增殖的正常现象。

THP-1细胞的传代

A、THP-1细胞是悬浮细胞，具有低密度依赖性，当细胞密度达到8×10^5个活细胞/mL时需要传代。细胞密度不得超过1×10^6活细胞/mL。

B、一般传代比例为1:2-4，可分瓶补充新鲜培养液，无需离心处理。以t25培养瓶为例，分瓶后补充新鲜完全培养基至7ml。

C、如对悬浮细胞密度把控不严，最佳方法为进行细胞计数。

D、培养约一周后可选择离心一次，去除一些死细胞。

THP-1细胞的冻存

A、使用10%DMSO：900μl FBS + 100μl DMSO（操作时注意安全）或使用无血清冻存液。

B、收集生长状态良好的细胞于15mL离心管中，调整总细胞浓度至200万-300万/mL以准备冻存。

C、根据情况将样品放入-80℃培养箱，最长可放置3个月，尽快转移至液氮中进行长期保存。

THP-1培养常见问题

1、如果THP-1细胞在培养过程中出现聚团，少量细胞聚团呈现葡萄串状，是正常现象，特别在低细胞密度时更为明显。密度高时，细胞会自然分散。如聚团情况严重，建议观察细胞状态，调整巯基乙醇的添加量，或更换血清品牌并增加血清比例（不超过20%）以助于解决问题。

2、在培养过程中细胞如有少量贴壁现象，属于正常情况，无需过于担心。可以轻吹或丢弃贴壁细胞。但若贴壁细胞比例超过20%，说明生长环境存在异常，此时应检查培养箱的温度及CO2浓度、培养基成分及培养器皿的状态，选择非TC处理过的培养瓶可减少细胞贴壁。

3、若THP-1复苏率较低，建议在冻存时适量提高细胞数量，活细胞密度应保持在100万-300万/mL以上。复苏后需培养3-5天，以便恢复状态。如出现细胞碎片，可待细胞密度增大后通过低速离心清除。作为悬浮细胞，在培养过程中应避免频繁离心，以减少对细胞的损害。换液时不应完全更换培养基。

4、在THP-1细胞培养中需添加β-巯基乙醇，建议现用现配，避免直接添加至完整培养基中的长期储存，以保持其稳定性。此外，选择ag尊龙凯时品牌的培养用品，能够确保细胞培养的高效性和可靠性。